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进行超高速的固液分离

芦荟多糖怎么提取?这是个很麻烦的事情,传统的方法有很多,但是如果需要生产,那就要用到特殊的分离方法,以下就是给大家描述怎么用最快捷的方法提取芦荟多糖。

芦荟为百合科芦荟,属多年生常绿草本植物,目前世界上已明确分类的有500种以上……研究发现,芦荟富含多种生物活性物质,广泛应用于食品、美容、保健、医药等领域。芦荟提取液中有效成分有芦荟多糖、芦荟甙、芦荟大黄素、芦荟大黄酸,其中,芦荟多糖是芦荟凝胶中的主要生物活性成分,具有抗癌、抗辐射、抗衰老、抑菌消炎、提高免疫力等药理作用。今天小编给大家详细讲讲芦荟多糖的提取、分离以及纯化。

芦荟多糖的提取

芦荟多糖的纯化

传统的提取芦荟粗多糖的方法有水提取法、酸提取法、碱提取法、酶提取法等,其中最为普遍的是水提醇沉法。丁晨等采用此种方法提取中华芦荟粗多糖,确定最佳提取工艺为料液比1:10 g/ml,提取2次,提取时间3h。

传统提取方法具有耗时长、产率低的缺点,因此常用其他方法对其辅助提取,主要有微波辅助提取法和超声波辅助提取法。

季铵盐是一类阳离子表面活性剂,可与酸性多糖形成不溶于的沉淀,而与中性多糖不生成沉淀,因此此法常用于酸性多糖的分离。

分别用传统热水浸提、超声波辅助和微波辅助提取方法研究库拉索芦荟粗多糖的提取条件,得出了三种方法的最佳提取条件对应的提取率分别是5.17%、5.42%、5.22%,而且后两种方法大大缩短了提取时间。

新型提取方法

新型提取方法主要有超临界流体萃取法和双水相萃取法。

芦荟多糖的分离

三氟三氯乙烷法除蛋白效率较高,但因溶剂沸点低,不易大量应用。

芦荟多糖的分离主要包括脱蛋白和去除小分子杂质等。

1、Sevage法

常见的三种方法

2、酶解法

酶解法即在多糖液中加入蛋白质水解酶(常用胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶等)将蛋白质降解,通常先用此法使蛋白质部分水解,再用Sevage法效果较好。

3、三氯乙酸法

三氯乙酸法是利用蛋白质与有机酸作用而变性沉淀,在多糖液中加入3%左右的三氯乙酸,加到不再继续产生沉淀为止,静置过夜,离心即得。此法除蛋白率较高,但易引起多糖的降解。

4、盐酸法

盐酸法是用盐酸将多糖液pH值调至3,放置过夜,离心去沉淀。此法脱蛋白率较高,但易引起多糖的降解。

5、三氟三氯乙烷法

常用的五种方法

粗多糖中常含有一些无机盐、单糖、低聚糖、氨基酸等小分子杂质,进一步纯化之前需去除这些杂质,常用的方法有透析、超滤等。

“芦荟多糖的功效与其结构密切相关,然而多糖结构复杂,分离纯化及分析比较困难,随着提纯、结构分析技术的不断发展及多糖功效机理研究的不断深入,芦荟多糖的探究空间和应用前景将更加广阔。”

传统方法与辅助提取方法

Sevage法是根据蛋白质在氯仿等有机溶剂中变性的特点,将多糖液与一定比例的有机溶剂混合,使蛋白质沉淀,离心除去。此法比较温和,在避免多糖降解上效果较好,但效率不高,需反复多次,多糖有损失。

1、分级沉淀法

(主要包括季铵盐沉淀法、有机溶剂分级沉淀法)

微波辅助提取法是通过微波热效应及产生的电磁波效应,加快分子的运动,迅速释放多糖。超声波辅助提取法是利用超声波的空化作用,使原料细胞壁易于破碎,有助于多糖的溶出。

有机溶剂分级沉淀法是根据不同多糖在不同浓度的低级醇或酮中具有不同溶解度的性质,依次按比例由小到大加入溶剂分级沉淀。崔春月用热水浸提法得到芦荟粗多糖,然后依次用50%和80%的乙醇得到了两种不同的活性多糖。

2、色谱分离法

色谱分离是纯化芦荟多糖最常用的方法,能有效分离多糖组分,作用温和,能较好地保存多糖的结构和生物活性。常用的方法有阴离子交换柱层析、凝胶柱层析、大孔树脂柱层析、高速逆流色谱法等。

阴离子交换柱层析法适用于纯化酸性多糖、中性多糖及粘多糖,常用的交换剂有DEAE——纤维素、DEAE——葡聚糖、DEAE——琼脂糖等。多糖在不同洗脱剂作用下通过吸附与解吸附作用得到分离,同时一些蛋白质和色素等杂质被吸附于柱上端,使多糖初步纯化。

凝胶柱层析又称凝胶过滤,是将多糖按分子大小和形状不同分离开来,由于不同大小和形状的分子扩散到凝胶孔隙内的速率不同,因而通过层析柱的快慢也不同,从而实现分离。常采用葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等。凝胶柱层析纯化的特点是惰性载体、吸附力弱、吸附条件温和,充分保留待分离物质的活性。一般纯化多糖时常将以上两种方法结合使用,吴广枫等对芦荟粗多糖先后用DEAE-纤维素和SephendexG-200进行了分级纯化,得到了多糖单一组分。

高速逆流色谱是一种高效的液—液分配色谱技术,不需要固相载体,特别适合天然活性成分的分离。王晓丽等研究了高速逆流色谱分离芦荟多糖的溶剂系统,成功分离出了两个多糖单一组分。

3.管式离心机分离法

通过管式离心机,进行超高速的固液分离,效果相当好。

点击次数:  更新时间:2017-07-06 14:26:58  【打印此页】  【关闭

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